PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIE TESTU
Chikungunya to rzadka infekcja wirusowa przenoszona przez ukąszenie zakażonego komara Aedes aegypti.Charakteryzuje się wysypką, gorączką i silnym bólem stawów, który zwykle trwa od trzech do siedmiu dni.Nazwa wywodzi się od słowa Makonde oznaczającego „to, co się wygina” w nawiązaniu do pochylonej postawy powstałej w wyniku artretycznych objawów choroby.Występuje w porze deszczowej
w tropikalnych obszarach świata, przede wszystkim w Afryce, Azji Południowo-Wschodniej, południowych Indiach i Pakistanie.Objawy są najczęściej klinicznie nie do odróżnienia od objawów obserwowanych w gorączce denga.Rzeczywiście, w Indiach odnotowano podwójne zakażenie dengą i chikungunya.W przeciwieństwie do dengi objawy krwotoczne występują stosunkowo rzadko i najczęściej jest to samoograniczająca się choroba przebiegająca z gorączką.Dlatego jest to bardzo ważne
klinicznego odróżnienia dengi od zakażenia CHIK.CHIK diagnozuje się na podstawie analizy serologicznej i izolacji wirusa u myszy lub hodowli tkankowej.Test immunologiczny IgM jest najbardziej praktyczną metodą badania laboratoryjnego.Szybki test Chikungunya IgG/IgM wykorzystuje rekombinowane antygeny pochodzące z białka jego struktury, wykrywa IgG/IgM anty-CHIK w surowicy lub osoczu pacjenta w ciągu 20 minut.Test może wykonać nieprzeszkolony lub
minimalnie wykwalifikowany personel, bez uciążliwego sprzętu laboratoryjnego.
ZASADA
Szybki test Chikungunya IgG/IgM+NS1 na antygen jest testem immunologicznym wykorzystującym chromatografię z przepływem bocznym.Kaseta testowa składa się z paska IgG/IgM i paska NS1.
Pasek IgG/IgM:1) bordowa podkładka z koniugatem zawierająca rekombinowane antygeny otoczki Chikungunya skoniugowane ze złotem koloidalnym (koniugaty dengi) i koniugaty króliczej IgG-złoto,2) pasek membrany nitrocelulozowej zawierający dwa paski testowe (pasma G i M) oraz pasmo kontrolne (pasmo C).Pasek G jest wstępnie pokryty przeciwciałem do wykrywania wirusa IgG przeciwko wirusowi Chikungunya, pasmo M jest pokryty przeciwciałem do wykrywania wirusa IgM przeciwko wirusowi Chikungunya, a pasmo C jest wstępnie pokryty kozim przeciwciałem przeciwko króliczej IgG.
Pasek NS1: 1) bordowa podkładka z koniugatem zawierająca mysi antygen Chikungunya NS1 skoniugowany ze złotem koloidalnym (koniugaty Chikungunya Ab), 2) pasek membrany nitrocelulozowej zawierający prążek testowy (pasek T) i prążek kontrolny (pasek C).Pasek T jest wstępnie pokryty króliczym antygenem anty-Chikungunya NS1, a pasmo C jest wstępnie pokryty kozim przeciwciałem anty-mysim IgG.
Pasek IgG/IgM: Po dodaniu odpowiedniej objętości próbki do studzienki kasety testowej próbka migruje w wyniku działania kapilarnego w poprzek kasety.Wirus IgG anty-Chikungunya, jeśli jest obecny w próbce, zwiąże się z koniugatami Chikungunya.Następnie kompleks immunologiczny jest wychwytywany przez odczynnik opłaszczony pasmem G, tworząc bordowy prążek G, co wskazuje na pozytywny wynik testu IgG wirusa Chikungunya i sugeruje niedawną lub powtarzającą się infekcję.Wirus IgM anty-Chikungunya, jeśli jest obecny w próbce, zwiąże się z koniugatami Chikungunya.Następnie kompleks immunologiczny jest wychwytywany przez odczynnik naniesiony na prążek M, tworząc bordowy prążek M, co wskazuje na pozytywny wynik testu IgM wirusa Chikungunya i sugeruje świeżą infekcję.Brak pasków testowych (G i M) sugeruje wynik negatywny. Test zawiera kontrolę wewnętrzną (pasek C), która powinna wykazywać bordowy pasek kompleksu immunologicznego koziego antykróliczego IgG/
koniugat króliczej IgG-złoto niezależnie od pojawienia się koloru na którymkolwiek z prążków T.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbkę należy zbadać innym urządzeniem.
Pasek NS1: Po dozowaniu odpowiedniej objętości próbki do studzienki kasety próbka migruje poprzez działanie kapilarne w poprzek kasety testowej.Chikungunya NS1 Ag, jeśli jest obecny w próbce, zwiąże się z koniugatami Chikungunya Ab.Następnie kompleks immunologiczny jest wychwytywany na membranie przez powleczone królicze przeciwciało anty-NS1, tworząc bordowy prążek T, co wskazuje na pozytywny wynik testu Chikungunya Ag.Brak pasma T sugeruje wynik negatywny.Test zawiera kontrolę wewnętrzną (pasek C), która powinna wykazywać bordowy prążek kompleksu immunologicznego koniugatu koziego antymysiego IgG/mysiego IgG-złota, niezależnie od obecności kolorowego prążka T.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbkę należy zbadać innym urządzeniem.
