PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIE TESTU
Leiszmanioza trzewna, zwana Kala-azar, jest rozsianą infekcją wywoływaną przez kilka podgatunków L. donovani.Według szacunków Światowej Organizacji Zdrowia (WHO) na tę chorobę cierpi około 12 milionów ludzi w 88 krajach.Choroba jest przenoszona na ludzi przez ukąszenia muchówek Phlebotomus, które zakażają się poprzez żerowanie na zakażonych zwierzętach.Chociaż jest to choroba występująca w biednych krajach Europy Południowej, stała się główną infekcją oportunistyczną u pacjentów z AIDS.Identyfikacja organizmu L. donovani z krwi, szpiku kostnego, wątroby, węzłów chłonnych lub śledziony zapewnia definitywną podstawę diagnozy.Serologiczne wykrywanie anty-L.donovani IgM jest doskonałym markerem ostrej leiszmaniozy trzewnej.Do testów stosowanych w klinice zalicza się testy ELISA, testy na przeciwciała fluorescencyjne czy testy aglutynacji bezpośredniej 4-5.Ostatnio wykorzystanie w teście białka specyficznego dla L. donovani radykalnie poprawiło czułość i swoistość.
Szybki test Leishmania IgG/IgM Combo jest testem serologicznym opartym na rekombinowanych białkach, który wykrywa jednocześnie przeciwciała IgG i IgM przeciwko L. Donovani.Test zapewnia wiarygodny wynik w ciągu 15 minut bez użycia jakichkolwiek przyrządów.
ZASADA
Szybki test Leishmania IgG/IgM jest testem immunologicznym wykorzystującym chromatografię z przepływem bocznym.Kaseta testowa składa się z: 1) podkładki z koniugatem w kolorze bordowym, zawierającej rekombinowany antygen L. donovani skoniugowany ze złotem koloidalnym (koniugaty Leishmania) i koniugaty króliczej IgG-złoto, 2) paska membrany nitrocelulozowej zawierającej dwa paski testowe (prążki T1 i T2) i pasmo kontrolne (pasmo C).Pasmo T1 jest wstępnie pokryte monoklonalną anty-ludzką IgM w celu wykrycia anty-L.donovani IgM, prążek T2 jest wstępnie pokryty odczynnikami do wykrywania przeciwciał anty-L.donovani IgG, a prążek C jest wstępnie opłaszczony kozim przeciwciałem przeciw króliczym IgG.
Po dodaniu odpowiedniej objętości próbki do studzienki kasety próbka migruje w poprzek kasety na zasadzie działania kapilarnego.IgM L. donovani, jeśli jest obecna w próbce, zwiąże się z koniugatami Leishmania.Następnie kompleks immunologiczny jest wychwytywany na membranie przez powleczone przeciwciało anty-ludzkie IgM, tworząc bordowy prążek T1, co wskazuje na pozytywny wynik testu L. donovani IgM.IgG L. donovani, jeśli jest obecna w próbce, zwiąże się z koniugatami Leishmania.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany przez wstępnie powleczone odczynniki na membranie, tworząc bordowy prążek T2, co wskazuje na pozytywny wynik testu L. donovani IgG.
Brak jakichkolwiek pasków T (T1 i T2) sugeruje wynik negatywny.Test zawiera kontrolę wewnętrzną (pasek C), która powinna wykazywać bordowy prążek kompleksu immunologicznego koniugatu koziego antykróliczego IgG/króliczego IgG-złota, niezależnie od rozwoju koloru któregokolwiek z prążków T.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbkę należy zbadać innym urządzeniem.
