PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIE TESTU
Malaria to przenoszona przez komary, hemolityczna choroba przebiegająca z gorączką, która zaraża ponad 200 milionów ludzi i zabija ponad 1 milion ludzi rocznie.Wywołują ją cztery gatunki Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Wszystkie te plazmodia infekują i niszczą ludzkie erytrocyty, wywołując dreszcze, gorączkę, anemię i splenomegalię.P. falciparum powoduje cięższą chorobę niż inne gatunki plazmatyczne i odpowiada za większość zgonów z powodu malarii, i jest jednym z dwóch najczęstszych patogenów malarii.
Tradycyjnie malarię rozpoznaje się na podstawie obecności organizmów na grubych rozmazach krwi obwodowej barwionych metodą Giemsy, a różne gatunki zarodźca rozróżnia się na podstawie ich obecności w zakażonych erytrocytach.Technika ta jest zdolna do dokładnej i niezawodnej diagnozy, ale tylko wtedy, gdy jest wykonywana przez wykwalifikowanych mikroskopistów przy użyciu określonych protokołów, co stanowi poważne przeszkody dla odległych i biednych obszarów świata.
Szybki test Pf Ag został opracowany z myślą o pokonywaniu tych przeszkód.Wykrywa specyficzny dla Pf antygen pHRP-II w próbce krwi ludzkiej.Może być wykonywany przez nieprzeszkolony lub minimalnie wykwalifikowany personel, bez sprzętu laboratoryjnego.
ZASADA
Szybki test Pf Ag jest testem immunologicznym opartym na chromatografii z przepływem bocznym.Składniki pasków testowych składają się z: 1) zabarwionej na bordowo podkładki z koniugatem zawierającej przeciwciało monoklonalne anty-pHRP-II skoniugowane ze złotem koloidalnym (koniugaty pHRP II-złoto), 2) paska membrany nitrocelulozowej zawierającej prążek testowy (Pf) i prążek kontrolny (prążek C).Prążek Pf jest wstępnie opłaszczony poliklonalnymi przeciwciałami anty-pHRP-II, a prążek C jest wstępnie opłaszczony kozią anty-mysią IgG.
Podczas testu do studzienki na próbkę (S) kasety testowej dozuje się odpowiednią objętość próbki krwi, a do studzienki na bufor (B) dodaje się bufor do lizy.Bufor zawiera detergent, który powoduje lizę krwinek czerwonych i uwalnia antygen pHRPII, który migruje w wyniku działania kapilarnego przez pasek trzymany w kasecie.pHRP-II, jeśli jest obecne w próbce, zwiąże się z koniugatami pHRP-II-złoto.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany na membranie przez wstępnie powlekane poliklonalne przeciwciała antypHRP II, tworząc bordowy prążek Pf, co wskazuje na pozytywny wynik testu Pf.
Brak prążka Pf sugeruje wynik ujemny.Test zawiera kontrolę wewnętrzną (prążek C), który powinien wykazywać bordowy prążek kompleksu immunologicznego koziej anty-mysiej IgG / mysiej IgG (koniugaty pHRP II-złoto) niezależnie od zabarwienia któregokolwiek prążka Pf.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbka musi zostać ponownie przetestowana przy użyciu innego urządzenia.
