PODSUMOWANIE I OBJAŚNIENIE TESTU
Malaria to przenoszona przez komary, hemolityczna choroba przebiegająca z gorączką, która zaraża ponad 200 milionów ludzi i zabija ponad 1 milion ludzi rocznie.Wywołują ją cztery gatunki Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Wszystkie te plazmodia infekują i niszczą ludzkie erytrocyty, wywołując dreszcze, gorączkę, anemię i splenomegalię.P. falciparum powoduje więcej poważnych chorób niż inne gatunki plazmodialne i odpowiada za większość zgonów z powodu malarii.P. falciparum i P. vivax są najczęstszymi patogenami, jednak występuje znaczne zróżnicowanie geograficzne w rozmieszczeniu gatunków.
Tradycyjnie malarię rozpoznaje się na podstawie obecności organizmów na grubych rozmazach krwi obwodowej barwionych metodą Giemsy, a różne gatunki zarodźca rozróżnia się na podstawie ich obecności w zakażonych erytrocytach.Technika ta jest zdolna do dokładnej i niezawodnej diagnozy, ale tylko wtedy, gdy jest wykonywana przez wykwalifikowanych mikroskopistów przy użyciu określonych protokołów, co stanowi poważne przeszkody dla odległych i biednych obszarów świata.
Szybki test Malaria Pf/Pv Ag został opracowany w celu rozwiązania tych przeszkód.Wykorzystuje przeciwciała specyficzne dla białka bogatego w histydynę P. falciparum II (pHRP-II) i dehydrogenazy mleczanowej P. vivax (Pv-LDH) w celu jednoczesnego wykrywania i różnicowania infekcji P. falciparum i P. vivax.Test może być przeprowadzony przez personel nieprzeszkolony lub o minimalnych kwalifikacjach, bez sprzętu laboratoryjnego
ZASADA
Szybki test Malaria Pf/Pv Ag jest testem immunologicznym opartym na chromatografii z przepływem bocznym.Składniki testu paskowego składają się z: 1) wkładki z koniugatem koloru bordowego zawierającego mysie przeciwciało anty-Pv-LDH skoniugowane ze złotem koloidalnym (koniugaty Pv-LDH-złoto) oraz mysie przeciwciało anty-pHRP-II skoniugowane ze złotem koloidalnym (koniugaty pHRP-II-złoto), 2) pasek membrany nitrocelulozowej zawierający dwa prążki testowe (prążki Pv i Pf) oraz prążek kontrolny (pasmo C).Prążek Pv jest wstępnie pokryty innym mysim przeciwciałem swoistym przeciwko Pv-LDH w celu wykrycia zakażenia Pv, prążek Pf jest wstępnie opłaszczony przeciwciałami poliklonalnymi anty-pHRP-II w celu wykrycia zakażenia Pf, a prążek C jest opłaszczony kozią anty-mysią IgG.
Podczas testu do studzienki na próbkę (S) kasety testowej dozuje się odpowiednią objętość próbki krwi, a do studzienki na bufor (B) dodaje się bufor do lizy.Bufor zawiera detergent, który powoduje lizę krwinek czerwonych i uwalnia różne antygeny, które migrują w wyniku działania kapilarnego przez pasek trzymany w kasecie.Pv-LDH, jeśli jest obecny w próbce, zwiąże się z koniugatami Pv-LDH-złoto.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany na membranie przez wstępnie powlekane przeciwciało anty-Pv-LDH, tworząc bordowy prążek Pv, co wskazuje na pozytywny wynik testu Pv.Alternatywnie pHRP-II, jeśli jest obecne w próbce, będzie wiązać się z koniugatami pHRP-II-złoto.Kompleks immunologiczny jest następnie wychwytywany na membranie przez wstępnie powlekane przeciwciała anty-pHRP-II, tworząc bordowy prążek Pf, wskazujący na pozytywny wynik testu Pf.Brak jakichkolwiek pasków testowych sugeruje wynik negatywny.Test zawiera kontrolę wewnętrzną (prążek C), który powinien wykazywać bordowy prążek kompleksu immunologicznego koniugatów koziej anty-mysiej IgG / mysiej IgG (anty-Pv-LDH i anty-pHRPII)-złota, niezależnie od zabarwienia któregokolwiek z pasków testowych.W przeciwnym razie wynik testu jest nieważny i próbka musi zostać ponownie przetestowana przy użyciu innego urządzenia.
